可調(diào)式移液器工作的基本原理是活塞通過彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)來實(shí)現(xiàn)吸液和放液的。在活塞推動(dòng)下,排除部分空氣,在大氣壓的作用下吸入液體的,再由活塞推動(dòng)空氣排出液體。由于彈簧具有伸縮性,在可調(diào)式移液器的使用中要配合彈簧的這個(gè)特點(diǎn)來操作,就可以很好地控制移液的速度和力量。
這種可調(diào)式移液器在生化實(shí)驗(yàn)中大量地使用,它們主要用于多次重復(fù)的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的準(zhǔn)確度(即容量誤差)為±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重復(fù)性誤差)更小些,為≤0.5%。吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入可調(diào)式移液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因?yàn)槲⊙宓鞍踪|(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí),吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層”液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。可調(diào)式移液器濃度和粘度大的液體,會(huì)產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補(bǔ)償量,可由試驗(yàn)確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定??捎梅治鎏炱椒Q量所取純水的重量并進(jìn)行計(jì)算的方法,來校正移液器,1mL蒸餾水20℃時(shí)重0.9982g。
可調(diào)式移液器可分為二種:一種是固定容量的,常用的有100μL等多種規(guī)格。每種移液器都有其的聚丙烯塑料吸頭,吸頭通常是一次性使用,當(dāng)然也可以超聲清洗后重復(fù)使用,而且此種吸頭還可以進(jìn)行120℃高壓滅菌;另一種是可調(diào)容量的可調(diào)式移液器,常用的有200μL、500μL和1000μL等幾種。
可調(diào)式自動(dòng)移液器的操作方法是用拇指和食指旋轉(zhuǎn)可調(diào)式移液器上部的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字,在移液器下端插上一個(gè)塑料吸頭,并旋緊以保證氣密,然后四指并攏握住可調(diào)式移液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到*停點(diǎn),將移液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時(shí)間),將吸頭沿器壁滑出容器,可調(diào)式移液器用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到*停點(diǎn),停留一秒鐘(粘性大的液體要加長停留時(shí)間),再按壓到第二停點(diǎn),吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。
校準(zhǔn)應(yīng)在無通風(fēng)的房間,可調(diào)式移液器和空氣溫度在20℃-25℃之間,相對濕度必需在55%以上。特別是當(dāng)移液量在50ul以下其空氣濕度應(yīng)越高越好以減少蒸發(fā)損失的影響。
在萬分之一級別天平上放置一個(gè)小三角燒瓶,用待標(biāo)定的可調(diào)式移液器吸取蒸餾水(隔夜存放)加入小三角燒瓶內(nèi)底部,每次稱重后計(jì)量,去皮重后再加蒸餾水,連續(xù)加蒸餾水10次。加蒸餾水的量根據(jù)待標(biāo)定的可調(diào)式移液器不同規(guī)格而不同,見下表。移液器10次標(biāo)定稱量在所要求的重量范圍之內(nèi)為合格移液器;不合格移液器需要進(jìn)行調(diào)整。可調(diào)式移液器標(biāo)定合格后,填寫自校記錄。